Capítulo 1
Extracción de tejido para análisis de ADN
2. Zonas de extracción de la muestra
4. Embalaje refrigerado para el traslado de la muestra
Se pueden identificar cadáveres o restos cadavéricos por las huellas dactilares, por radiografías dentarias u óseas, por cicatrices, etc. Actualmente, la tecnología permite también identificar los restos humanos mediante el ADN, ya que este es único en cada persona y su análisis permite distinguir a una persona de las otras.
El almacenaje de las muestras extraídas de ADN permite disponer de una información genética familiar, que puede ayudar a curar enfermedades hereditarias en un futuro o incluso prevenirlas.
Para que la muestra de ADN llegue correctamente al laboratorio es de suma importancia el correcto embalaje y su traslado, así como la adecuada cumplimentación de los formularios de la cadena de custodia requeridos por los protocolos de recogida, identificación, transporte y documentación del banco de tejidos o laboratorio al que se enviarán las muestras.
Antes de realizar cualquier intervención, el personal encargado de extraer las muestras deberá contar con la solicitud de extracción de la autoridad competente, en un caso judicial, o de la familia, si es solicitada por ella.
El ADN se puede conseguir prácticamente de cualquier material biológico, pero se destacará el tipo de muestra más apto, que en los casos de personas fallecidas dependerá de cómo se encuentre el estado del cadáver.
Se procurará que la extracción se realice en una zona no visible y se suturará y/o sellará donde se realizó la extracción para evitar la pérdida de fluidos.
Importante
Antes de proceder a la extracción de la muestras, siempre se verificará la identidad del cadáver.
El personal asignado o autorizado para realizar las extracciones de tejidos debe protegerse de los posibles riesgos patógenos de acuerdo a los protocolos que, en medida de prevención, disponga la empresa (hepatitis, VIH, etc.) que los tejidos humanos pueden contener.
Precauciones universales:
Son cadáveres de muertes recientes que, por circunstancias medioambientales, se mantuvieron en un buen estado.
Una vez elegida la zona de extracción, se higienizará con toallitas preparadas para el caso, o con una gasa mojada en un líquido desinfectante.
El tejido elegido habitualmente es el muscular, por ser más resistente a la descomposición en comparación con vísceras u órganos.
Se optará por los tejidos mejor conservados, con un bisturí se seccionará un fragmento de músculo con forma rectangular que debe pesar de 10 a 20 g.
Selección del músculo bíceps
Selección del músculo gastrocnemio, popularmente gemelo
No existe una prioridad en los músculos a escoger mientras se encuentren en un buen estado de conservación: bíceps, tríceps, cuádriceps o bíceps femoral, entre otros.
Sabía que…
En el caso de que las muestras que se tuvieran que recoger fueran restos de vísceras, el corazón, igual que el tejido muscular, resiste mejor la descomposición.
Una vez extraídas las muestras, se deben aislar y proteger rápidamente para evitar contaminarlas con restos biológicos o químicos. Se depositarán rápidamente dentro de un recipiente con boca ancha, esterilizado y estanco.
Cuando los tejidos están en avanzado estado de descomposición, los huesos o las piezas dentarias son los más apropiados para la extracción de muestras de ADN.
Si solamente quedan restos del esqueleto, se extraerá el ADN de la médula del interior del hueso, aunque se enviará una parte ósea para que el laboratorio extraiga la muestra.
Los huesos alargados son los más adecuados, preferentemente los fémures, aunque también pueden servir las costillas, falanges, cúbitos y humerales. Las muestras deben medir de 15 a 20 cm.
Fémur humano
Corte del fémur
Si los huesos contienen restos de tejidos blandos (putrílago) se tienen que retirar antes de tomar la muestra.
Si la muestra se va a extraer de los dientes, preferiblemente se optará por los molares en buen estado y sin tratamientos odontológicos. Se han de extraer de 2 a 4 piezas.
Extracción molar
Limpieza molar
Actividades
1. ¿Por qué el fémur es un hueso ideal para un análisis de ADN?
2. ¿Las muestras de pelo para pruebas maternas o paternas varían si el pelo dispone del folículo capilar?
3. ¿De la calcinación total de un cuerpo se pueden obtener muestras de ADN?
Aplicación práctica
Suponga que unos familiares desean guardar muestras genéticas de un familiar fallecido en un banco de ADN, para futuras pruebas de enfermedades hereditarias. Han pasado tres horas desde que el difunto falleció de muerte ordinaria y está depositado en las neveras de una morgue. Con estos datos, puede sopesar el estado de conservación del cadáver.
En función de la valoración, ¿de dónde se extraería la muestra e inicialmente cómo se conservaría?
SOLUCIÓN
Siempre que se pueda, se tomará una muestra de tejido muscular. Si no fuera posible, se valorarían otras alternativas. Siempre se tomarán las muestras necesarias, para posibles controles, y se conservarán refrigeradas hasta su llegada al banco de tejidos, que será con la mayor brevedad posible.
En el caso de que la carbonización no sea absoluta, se pueden extraer las muestras de tejidos musculares que hubieran estado más alejadas de las altas temperaturas.
Si los tejidos blandos y los huesos estuvieran totalmente calcinados, el laboratorio responsable del análisis evaluará qué muestras son las más adecuadas para realizar el estudio de ADN.
Los productos conservantes dañan gravemente la cadena de ADN. Por eso, en caso de que un cadáver se tenga que embalsamar, primero se realizaría la extracción de ADN y luego se conservaría.
Si el cuerpo ya estuviera embalsamado artificialmente con productos biocidas, se valoraría qué partes del cuerpo estuvieron menos expuestas a los productos conservantes, como por ejemplo muelas, cabello, uñas, y se informaría al laboratorio de destino del producto utilizado.
Durante la extracción y manipulación de las muestras, se deben utilizar algunos protocolos que garanticen la no contaminación de estas.
El uso de bata, mascarilla y guantes estériles evitará que uno mismo pueda ser la causa de la contaminación de la muestra.
Para ello, lo primero será ponerse la bata y la mascarilla, preparando a continuación un campo estéril, donde se colocará el instrumental necesario.
Se limpiará la zona de extracción como se ha comentado, para después colocarse los guantes estériles.
Las muestras tomadas seguirán el protocolo marcado por el banco de tejidos o laboratorio al que irán destinadas.
Recuerde
Es prioritario guardar las muestras en un envase estéril inmediatamente después de su extracción para su protección.
Los tejidos se guardarán en un envase estéril y hermético que garantice su cierre y nunca se añadirá ningún tipo de conservante a los tejidos.
Envasado de la muestra
Las muestras se refrigerarán, tras la toma, entre 2 y 6 ºC para enviarse inmediatamente al banco de tejidos, centro forense o al organismo que haya realizado la solicitud de extracción.
Los huesos se envolverán con papel y se colocarán en cajas de cartón acordes con su tamaño. Las cajas deben precintarse y los huesos pueden enviarse sin ser refrigerados.
Muestra de fémur
Empaquetado de fémur
Muestras guardadas en caja de cartón
Los molares, igual que los huesos, se envolverán en papel y se guardarán en cajas de cartón precintadas acordes con su tamaño. No es necesaria su refrigeración.
Muestra de tres molares
Empaquetado de molares
Nota
Se debe evitar que la luz solar se refleje sobre las muestras.
Actividades
4. ¿Por qué es recomendable la extracción de dos a cuatro piezas dentarias si con una podría ser suficiente?
5. ¿Se pueden extraer muestras sanguíneas en cadáveres para análisis de ADN?
6. ¿El laboratorio puede pedir que las muestras, por ejemplo de hueso, sean enviadas dentro de envases llenos de alcohol de 95º?
Aplicación práctica
Imagine que acaba de extraer una muestra de costilla de un cadáver con las medidas recomendadas.
¿Qué tratamiento se le debe dar a la muestra de costilla y en qué condiciones de embalaje se debe transportar al laboratorio?
SOLUCIÓN
La muestra de costilla debe quedar limpia de tejidos blandos, posteriormente se le aplica alcohol de 95º y se tiene que secar. El hueso no se refrigera, se embala en papel y en este se especifica qué tipo de muestra es, fecha de extracción y el nombre y apellidos del cadáver.
La muestra irá en una caja de cartón de medida según la muestra, y en esta se anotará el nombre y apellidos del cadáver, número de muestra y tipo de muestra.
Es preciso que todos los recipientes (tubos, bolsas, sobres, etc.) estén correctamente identificados para asegurar la autenticidad de las muestras con un marcador permanente.
Anotaciones necesarias:
Los materiales deben estar esterilizados antes de la extracción. Los materiales son los siguientes:
Útiles para extracción de tejidos blandos
Caja de poliestireno con refrigerantes y sujeta-envases
Refrigerantes
Es imprescindible que los embalajes donde se transportan las muestras estén correctamente identificados como los envases con las muestras para preservar la identidad. El embalaje debe estar identificado en su exterior con la siguiente información:
Embalajes identificados
También es necesario que se refrigeren los tejidos blandos o líquidos, justo después de su extracción, o se sigan las instrucciones del centro al que se van a transportar para su correcta conservación durante su traslado al laboratorio para su posterior análisis.
Después de la extracción, es conveniente que las muestras lleguen al laboratorio lo antes posible.
Importante
En el supuesto de que haya más de una muestra, siempre estarán envasadas en diferentes envases con su correspondiente rotulación.
Los huesos o piezas dentarias no necesitarán refrigeración.
Las muestras que deban estar refrigeradas (tejidos blandos, sangre, vísceras, piel) conservarán la temperatura hasta el laboratorio con refrigerantes y cajas de poliestireno.
Muestras conservadas
El empaquetado para el traslado al laboratorio es fundamental para la protección de las muestras, identificación y la refrigeración (si fuera el caso).
Cada muestra estará empaquetada en un envase acorde con su tamaño e identificada.
Actualmente en el mercado existen kits para estas funciones.
El envío de cualquier muestra al laboratorio irá acompañado de un formulario donde constará:
Dependiendo del laboratorio o la situación, este puede facilitar el formulario de la cadena de custodia. Si no es el caso, cada centro de extracción utilizará sus formularios o el laboratorio requerirá la información que sea necesaria.
Puede haber matices en los protocolos de recepción de muestras en cada laboratorio. Se mencionarán los puntos estándares en la recepción.
El personal del laboratorio que recoge las muestras comprobará el estado de los embalajes y rellenará un formulario de recepción con los siguientes apartados:
También se pueden extraer muestras de uña, pelo o sangre del cadáver.
Con una jeringuilla se puede extraer una muestra de sangre de la vena subclavia o yugular o cualquier otra vena, incluso directamente del corazón. La muestra se deposita en tubos médicos con anticoagulante adecuado y debe ser refrigerada hasta su llegada al laboratorio.
Se cortan con unas tijeras y se embalan individualmente envueltas en papel, el transporte se puede realizar en una bolsa también de papel y no es necesario refrigerarlas.
Los pelos no se cortan, se deben extraer con su raíz, ya que esta puede servir para sus posteriores pruebas. Debe haber una cantidad de treinta a cuarenta pelos para asegurar una correcta extracción de ADN. Son embalados en un papel y se pueden transportar en una bolsa de papel sin ser refrigerados.
La extracción de muestras debe realizarse con las medidas necesarias para no contaminarlas de materiales biológicos o químicos porque se alterarían los resultados, como también se deben tomar las medidas oportunas para la protección de la salud del personal encargado de la extracción.
La elección de la muestra (tejidos blandos, sangre, huesos o de restos biológicos) dependerá del estado de conservación del cadáver.
Inmediatamente después de extraer las muestras, se depositarán en su envase pertinente y en este se anotará la información requerida para la identificación de estas.
El embalaje para trasladar las muestras hasta el laboratorio será estanco y correctamente identificado con la información requerida.
Los embalajes irán acompañados con los formularios de cadena de custodia.
Ejercicios de repaso y autoevaluación
1. Indique si las siguientes frases son verdaderas o falsas:
2. Complete la siguiente oración con los siguientes términos:
refrigerarlas / esqueletizados / descomposición / dentarias / huesos / laboratorio
Las muestra de ___________ o piezas __________ extraídas de restos cadavéricos en ____________ o ________________ no es necesario ____________ para su conservación o traslado al ____________.
3. Ordene los siguientes pasos, cuando la extracción de las muestras se realiza en un cuerpo carbonizado:
4. Las muestras de hueso extraídas…
5. En el embalaje se anota…
6. Una muestra ósea es conveniente que mida…
7. Relacione los siguientes elementos:
8. En el formulario de cadena de custodia se tienen que anotar los siguientes datos:
9. ¿Cuándo se realiza la extracción de hueso para análisis de ADN?
10. Complete los huecos de la frase con los siguientes términos:
muestras / tipo / recipientes / fecha / errores
En todos los ____________ que contengan ___________ deben constar las anotaciones de ____________ de tejido, _____________ de extracción y nombre del cadáver, para poder evitar ____________ en la autenticidad de las muestras.
11. En las rotulación de la muestras se especifica el…
12. Antes de extraer las muestras se debe…
13. ¿En cadáveres que hayan sufrido una quemadura también se podrían extraer muestras de tejidos blandos?
14. Durante la extracción, ¿por qué se utilizan guantes, batas, mascarillas?
15. Encuentre cinco palabras relacionadas con los embalajes de muestras y los útiles de extracción.
